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Comparaison des résultats pour les patients atteints de Borrelia garinii et de Borrelia afzelii isolés du liquide céphalo-rachidien

Contexte La cause la plus fréquente de la neuroborréliose de Lyme en Europe est Borrelia garinii, suivie de Borrelia afzelii. Cependant, aucune série décrivant des cas de neuroborréliose de Lyme confirmés par culture n’a été publiée et aucune comparaison n’a été trouvée chez les patients atteints de B garinii et B afzelii. Méthodologie Tous les patients adultes identifiés dans un seul centre médical pendant une période ayant des borrélies isolées du LCR et typés B garinii ou B afzelii en utilisant de grands motifs de fragments d’ADN obtenus avec l’endonucléase de restriction MluI et séparés par des impulsions. Une comparaison des patients qui avaient B garinii isolé du LCR avec des patients qui avaient B afzelii isolé du LCR a révélé qu’un diagnostic clinique fiable de la neuroborréliose de Lyme avant l’obtention d’une culture de LCR et d’un résultat intrathécal de production d’anticorps borréliaux a été établi plus fréquemment. dans le groupe B garinii que je n groupe de patients B afzelii vs patients Les patients du groupe B garinii ont signalé des douleurs radiculaires et des signes méningés plus fréquents, mais les étourdissements ont été moins fréquents. Plusieurs autres symptômes et / ou signes étaient comparables. Pléïocytose lymphocytaire, ainsi que plusieurs autres Les anomalies du LCR étaient fréquentes chez les patients atteints de B garinii isolés du LCR mais rares chez les patients du groupe B afzeliiConclusions Les patients atteints de B garinii isolés de leur LCR présentent une présentation clinique distincte, par rapport aux patients atteints de B afzelii B garinii , est considéré comme un syndrome de Bannwarth typique de Lyme neuroborréliose précoce, alors que les caractéristiques cliniques associées à B afzelii sont beaucoup moins spécifiques et plus difficiles à diagnostiquer

La borréliose de Lyme est la maladie transmise par les tiques la plus commune dans l’hémisphère Nord Elle est causée par Borrelia burgdorferi sensu lato La maladie humaine est associée au moins aux espèces Borrelia: B burgdorferi sensu stricto B burgdorferi, Borrelia afzelii et Borrelia garinii Tous les isolats provenant de patients nord-américains appartenaient au groupe génomique B burgdorferi, alors que les isolats européens incluaient au moins des génospécies supplémentaires: B afzelii et B garinii Bien que probablement toutes les espèces puissent causer toutes les manifestations majeures, il existe des indications B burgdorferi sensu lato genospecies entraîne des manifestations cliniques distinctes de la borréliose de Lyme, probablement en raison de leur organotropisme distinct Par exemple, en Europe, B afzelii est principalement associé à des manifestations cutanées, telles que l’érythème migrant EM et l’acrodermatite chronique atrophiante, tandis que B garinii est la principale cause de Lyme neuroborreliosis [, -] Differenc La répartition géographique des génospécies peut expliquer les distinctions entre le tableau clinique de la borréliose de Lyme en Europe et en Amérique du Nord [,,] Bien que les données indiquant l’association des différentes génospécies de B burgdorferi sensu lato avec des manifestations cliniques distinctes de borréliose de Lyme sont relativement abondantes. comparaisons évidentes des caractéristiques des manifestations cliniques individuelles causées par différentes espèces de Borrelia sont en fait très rares En fait, l’information est limitée aux rapports concernant les patients atteints de EM Comparaison des EM confirmées par culture causées par B afzelii avec L’EM causée par B burgdorferi a montré des différences dans les résultats épidémiologiques, cliniques et de laboratoire, suggérant des syndromes distincts qui sont provoqués par différents agents Deux autres études ont démontré plusieurs différences entre EM afzelii et B garinii la présente étude était d’évaluer plus loin l’idée que les caractéristiques de les manifestations cliniques individuelles de la borréliose de Lyme dépendent des espèces de B burgdorferi sensu lato; en comparant les résultats chez les patients adultes avec B afzelii ou B garinii isolés du LCR, nous avons testé l’hypothèse que les caractéristiques de la neuroborréliose de Lyme dans les groupes diffèrent

Patients et méthodes

Patients La partie clinique de l’étude a été réalisée au Département des maladies infectieuses du Centre médical universitaire de Ljubljana, Slovénie. L’approche de l’étude a été approuvée par le comité d’éthique médicale du Ministère de la Santé de la République de Slovénie. approche identique dans le traitement des patients présentant une neuroborréliose de Lyme potentielle pour & gt; En résumé, chez les patients atteints de borréliose de Lyme qui présentent des signes cliniques ou des symptômes évocateurs d’une atteinte du SNC, une ponction lombaire est effectuée et des échantillons de LCR sont examinés, y compris l’évaluation de la production d’anticorps intrathécaux et la culture d’échantillons de LCR. borrelia Les patients présentant des présentations cliniques hétérogènes sont abordés, y compris les patients présentant des signes évidents de neuroborréliose de Lyme et les patients présentant des indications cliniques vagues de la participation au SNC; Pour certains de ces patients, le but principal de l’évaluation est d’exclure la neuroborréliose de Lyme. Avant la réception de la culture borrelia et des résultats de la production d’anticorps intrathécaux borrelia, les patients sont classés selon les données cliniques et de laboratoire de base comme ayant une neuroborréliose de Lyme “Neuroborréliose de Lyme, ou” possible “Lyme neuroborréliose Un diagnostic clinique provisoire de la neuroborréliose de Lyme évidente est fait pour les patients atteints de pléocytose lymphocytaire et EM vérifiés au cours des derniers mois avant atteinte neurologique. Un diagnostic clinique provisoire de neuroborréliose de Lyme hautement probable est fait. Patients présentant une pléocytose associée à une radiculonévrite et / ou une paralysie faciale périphérique mais sans information sur l’EM Les patients présentant des symptômes pouvant indiquer une atteinte du SNC mais ne remplissant pas les critères cliniques simples pour une neuroborréliose de Lyme évidente ou hautement probable sont provisoirement interprétés Les premiers groupes sont catégorisés indépendamment des résultats des anticorps Borrelia, alors que les représentants du troisième groupe doivent être séropositifs pour Borrelia ou avoir un sous-ensemble EMA de patients avec des résultats de culture CSF positifs pour Borrelia, c’est-à-dire tous les patients adultes. avec B burgdorferi sensu lato isolé à partir d’échantillons de CSF et tapé comme B garinii ou B afzelii en utilisant de grands modèles de fragments d’ADN qualifiés pour l’enrôlement dans la présente étude Les patients ont été divisés en groupes selon l’étiologie; Pour chaque patient, des échantillons de sérum et de liquide céphalorachidien ont été prélevés. Des analyses sanguines et des analyses du liquide céphalorachidien ont été effectuées pour déterminer le nombre de cellules, la concentration en protéines, les niveaux d’albumine, les niveaux d’immunoglobulines. , et les niveaux de glucose CSF WBC comptent & gt; × Les cellules / L ont été considérées comme anormales et évocatrices de méningite. Les anticorps IgM et IgG anti-CS et IgM dirigés contre B burgdorferi sensu lato ont été déterminés par immunofluorescence indirecte. Un isolat local de B afzelii a été utilisé comme antigène Titres d’anticorps sériques de ⩾: et CSF les titres d’anticorps ⩾ ont été jugés positifs sur la base des résultats du groupe témoin de la même région géographique La présence de la production intrathécale d’anticorps borréliaux a été établie à l’aide de la capture EIA DakoPour chaque patient, un échantillon -mL de LCR, obtenu par ponction lombaire, a été immédiatement inoculée dans du milieu modifié de Kelly-Pettenkofer et rapidement transportée au laboratoire. Pour plusieurs patients, des échantillons de biopsie cutanée et des échantillons sanguins -mL ont également été obtenus pour la culture. semaines pour la présence de spirochètes par microscopie à fond noir Les souches isolées ont été sous-cultivées – fois L’ADN génomique total a été extrait par le méthode d’insertion sur gel, comme décrit ailleurs Pour l’identification des espèces, l’ADN génomique a été digéré avec l’enzyme de restriction U de MluI, soumis à une électrophorèse sur gel d’agarose en h avec un temps pulsé augmenté de s et coloré au bromure d’éthidium. Selon Belfaiza et al et Picken et al , la variation intraspécifique des profils de LRFP Mla pour B afzelii et Mlg pour B garinii a été indiquée par numéro de type Différences dans les données quantitatives analysé par le test de Kruskal-Wallis, et les différences dans les données qualitatives ont été analysées par le test de Yates corrigé or ou par le test exact de Fisher avec le logiciel Epi Info, version Centers for Disease Control and Prevention; P & lt; a été considéré comme indiquant une signification statistique

Résultats

Parmi les patients qui ont consenti à participer à l’étude et qui ont cultivé des spécimens de CSF pour la présence de borreliae,% ont eu des résultats de culture positifs. Dans% de ces patients, les borreliae ne se développaient pas assez bien pour permettre l’analyse. ont été typés comme B burgdorferi, et avaient des isolats qui ont été typés comme B afzelii ou B garinii Ces patients ont été inclus dans la présente comparaison; pour les patients remplissant les critères de diagnostic provisoire de neuroborréliose de Lyme évidente ou très probable, le taux d’isolement était de% de, alors que chez les patients restants, le taux d’isolement était de% de P = Vingt-trois patients avec des sous-types de B garinii, Mlg-, Mlg-, et Mlg- et patients avec B afzelii Mla isolé des échantillons de CSF ont été analysés Un diagnostic clinique provisoire effectué avant l’obtention de la culture CSF et intrathécale des résultats de production d’anticorps borréliaux de neuroborréliose de Lyme évidente ou hautement probable a été établi pour% des patients du groupe B garinii, mais seulement pour% des patients avec B afzelii isolés du LCR Les patients atteints d’une infection à B garinii qui présentaient des anomalies de routine du LCR et ne remplissaient donc pas les critères d’un diagnostic clinique une neuroborréliose probable de Lyme a présenté des indications cliniques qui auraient pu indiquer une neuroborréliose de Lyme Un patient s’est présenté à l’hôpital avec mal de tête et paralysie faciale périphérique avec des durées de mois et de jours, respectivement. L’autre patient avait eu des mois d’EM solitaire avant l’examen dans notre département; malgré un traitement par la doxycycline à la posologie de mg deux fois par jour pendant plusieurs jours, EM a été suivie, après plusieurs semaines, de malaise et de fatigue, de légers maux de tête, étourdissements, paresthésies, somnolence et arthralgies. Le troisième et quatrième patient de ceux qui avaient des résultats normaux réguliers de CSF mais des résultats positifs de culture de CSF, avaient des EM EM et des douleurs radiculaires pour EM patient et multiple et des céphalées de courte durée pour le patient et avaient des échantillons CSF examinés – des mois plus tôt; Chez les deux patients, la pléocytose lymphocytaire et des concentrations élevées de protéines avaient été établies à ce moment, mais aucun patient n’avait reçu de diagnostic de neuroborréliose de Lyme. Dans le groupe B afzelii, les indications cliniques de neuroborréliose de Lyme étaient moins évidentes. Durée des symptômes indiquant une atteinte potentielle du système nerveux central pendant ⩽ mois avant l’examen des échantillons du liquide céphalorachidien: un délai arbitraire pour la distinction entre la neuroborréliose de Lyme précoce et tardive a été signalé plus souvent dans le groupe B garinii Treize pour cent des patients du groupe B garinii et% des patients du groupe B afzelii ont déclaré avoir eu une EM typique. Néanmoins, au moment de l’examen des échantillons de LCR, la lésion était plus fréquente que dans le groupe B afzelii. encore visible pour% des patients du groupe B garinii, comparé à f Patients du groupe B afzelii Les caractéristiques démographiques et cliniques de base des patients pour lesquels B burgdorferi sensu lato a été isolé à partir d’échantillons de LCR sont présentées dans le tableau

Tableau View largeTélécharger les caractéristiques démographiques et cliniques pour les patients atteints de Borrelia garinii et les patients atteints de Borrelia afzelii isolé à partir d’échantillons de LCRTable View largeTélécharger les caractéristiques démographiques et cliniques pour les patients atteints de Borrelia garinii et les patients atteints de Borrelia afzelii isolées à partir des échantillons de LCR les symptômes dans les groupes ont révélé que les patients du groupe B garinii présentaient des douleurs radiculaires et présentaient des signes méningés plus souvent que les patients du groupe B afzelii, alors que les vertiges étaient plus fréquents chez les patients du groupe B afzelii que chez ceux du groupe B garinii groupe; les fréquences d’apparition de plusieurs autres symptômes et signes étaient comparables tableau

Tableau View largeTélécharger diapositives Symptômes et signes signalés chez des patients atteints de Borrelia afielii et de Borrelia afzelii isolés à partir d’échantillons de LCRTable AgrandirDisque de téléchargementSymptômes et signes signalés chez des patients atteints de Borrelia garinii et de Borrelia afzelii isolés à partir d’échantillons de LCRPleocytose avec prédominance de lymphocytes des patients avec B garinii isolés des échantillons de CSF, alors que dans le groupe B afzelii, tous sauf les patients avaient ⩽ × cellules / L dans les échantillons de LCR. Les concentrations de protéines dans les échantillons de LCR étaient plus élevées et plus élevées chez les patients du groupe B garinii Par rapport aux patients du groupe B afzelii De plus, les patients du groupe B garinii qui présentaient des anomalies du liquide céphalo-rachidien et des résultats positifs à la culture du LCR avaient eu une pléocytose lymphocytaire et des concentrations élevées de protéines à l’examen – des mois plus tôt. trouvé pour plusieurs autres par CSF Le tableau ci-dessous montre les preuves de laboratoire d’une infection borréliale chez des patients atteints de borrélies isolées du LCR. Les souches, isolées à partir d’échantillons de peau et de sang, étaient congruentes aux isolats correspondants des échantillons de LCR par rapport aux espèces et au sous-type

Tableau View largeDownload slideDétectives cliniques et de laboratoire pour les patients atteints de Borrelia garinii et les patients atteints de Borrelia afzelii isolés à partir d’échantillons CSFTable View largeTélécharger les résultats cliniques et de laboratoire pour les patients atteints de Borrelia garinii et les patients atteints de Borrelia afzelii isolés à partir d’échantillons CSF

Tableau View largeDownload slideL’état clinique de l’infection borréliale chez des patients atteints de Borrelia garinii et des patients atteints de Borrelia afzelii isolés à partir d’échantillons du LCRTable View largeDownload slideDisposition de laboratoire d’infection borréliale chez les patients atteints de Borrelia garinii et les patients atteints de Borrelia afzelii isolés à partir d’échantillons CSF

Discussion

[,,,,] En général, le symptôme clinique le plus important est la douleur causée par la radiculonévrite. La douleur radiculaire est plus fréquente chez les Européens que chez les Américains et est plus fréquente et plus prononcée chez les adultes que chez les enfants [,,, -] rapport de ce qui, des années plus tard, a été classé comme neuroborréliose précoce de Lyme à Depuis l’étiologie de la borréliose de Lyme a été déterminée, plusieurs groupes de patients atteints de neuroborréliose de Lyme ont été décrits; Cependant, aucune série de patients atteints de neuroborréliose de Lyme confirmée par culture n’a été publiée. Nous présentons ici un groupe de patients avec B garinii ou B afzelii isolé à partir d’échantillons de LCR. Le diagnostic de neuroborréliose précoce de Lyme est généralement basé sur des caractéristiques cliniques, la présence de la pléocytose lymphocytaire, et la démonstration de l’infection borréliale du SNC, comme en témoigne la séroconversion, la production intrathécale d’anticorps borréliaux, l’isolement de borreliae des échantillons de CSF, ou la démonstration de l’ADN borrélial dans les échantillons de CSF [,,] être un critère utile dans notre étude, la séroconversion a été établie chez les patients, car au moment de l’apparition des signes neurologiques, la majorité des patients sont séropositifs. De plus, la séroconversion confirme une infection récente, mais elle ne confirme pas l’atteinte du SNC. limites de la PCR pour la démonstration de l’ADN borrélial dans les échantillons de LCR sont une faible sensibilité, le L’isolement de l’agent étiologique à partir d’échantillons de patients est la méthode la plus fiable pour le diagnostic d’une infection borréliale, et l’isolement de l’agent étiologique des échantillons de LCR est le plus fiable. la méthode la plus fiable pour le diagnostic de la neuroborréliose de Lyme Cette méthode fournit également des microorganismes vivants, qui peuvent être caractérisés. Cependant, l’isolement des échantillons de LCR est une procédure à faible rendement, et les résultats ne peuvent être obtenus qu’après plusieurs semaines. Dans la pratique clinique quotidienne en Europe, la démonstration d’anticorps borréliaux synthétisés par voie intrathécale a généralement été utilisée pour l’établissement du diagnostic de neuroborréliose de Lyme. Le problème de cette approche diagnostique est l’insensibilité pendant les premières semaines d’atteinte du SNC et sa longue persistance; la production intrathécale d’anticorps borréliaux peut être détectée pendant plusieurs mois ou années, même après une thérapie appropriée avec des antibiotiques [,,] Notre étude nous a permis d’évaluer la sensibilité de la production intrathécale d’anticorps borréliaux chez un groupe de patients. isolé des échantillons de LCR Nous avons pu démontrer une production intrathécale d’anticorps borréliaux chez seulement% des patients, dont% du groupe B garinii et% du groupe B afzelii. La courte durée de la maladie pourrait expliquer l’absence d’intrathécal la production d’anticorps borréliaux chez plusieurs patients du groupe B garinii sans production intrathécale d’anticorps borréliaux présentait une durée de symptômes indiquant une atteinte potentielle du SNC de ⩽ jours; de ces patients ont présenté une paralysie faciale périphérique; cependant, une telle explication serait plausible pour les patients du groupe B afzelii. Bien que l’on confirme l’isolement de Borrelia dans les échantillons de LCR pour confirmer l’implication du SNC, une telle constatation ne confirme pas automatiquement que les résultats de culture positifs sont bien représentatifs du laboratoire et des résultats cliniques La plupart des patients présentant une neuroborréliose de Lyme.Information sur le rôle prédominant de B garinii comme agent étiologique chez les patients européens atteints de neuroborréliose de Lyme a été basée sur des résultats de typage pour Borrelia isolés d’échantillons de LCR obtenus chez des patients atteints de neuroborréliose de Lyme. de matériel génétique distinct des espèces de Borrelia dans les échantillons de LCR et sur les réponses sérologiques spécifiques des espèces Avec chacune de ces approches, les principales espèces retrouvées chez les patients atteints de neuroborréliose de Lyme étaient B garinii, suivi de B afzelii les conceptions de certaines des études citées ne permettent pas de conclusions très précises pect à la proportion des agents étiologiques en raison de plusieurs biais potentiels dans la collecte des isolats et dans la sélection des isolats pour le typage. Les résultats de notre étude sont basés sur des patients consécutifs enregistrés dans un même centre pendant une période pour laquelle les borreliae étaient isolées des échantillons de CSF et représentent donc un rapport fiable des isolats de B garinii aux isolats de B afzelii% vs% Cependant, en utilisant cette approche, nous avons exclu non seulement quelques patients avec B burgdorferi isolés des échantillons de CSF mais aussi un nombre important de les patients avec une culture positive de CSF dont nous n’avons pas été capables de récolter suffisamment de borreliae pour effectuer un typage avec le PFLT qui nécessite une forte densité de Borrelia en culture

Tableau View largeTélécharger l’étiologie de la neuroborréliose de Lyme chez les patients européens selon l’espèce de Borrelia burgdorferi sensu latoTable View largeTélécharger l’étiologie de la neuroborréliose de Lyme chez les patients européens selon les espèces de Borrelia burgdorferi sensu latoLa majorité de nos patients neuroborréliose de Lyme probable, mais pour plusieurs patients, les indications cliniques de l’implication du SNC étaient assez vagues, et l’isolement des borreliae des échantillons de CSF était plutôt surprenant. Une comparaison des résultats pour le groupe B garinii et B afzelii a révélé que la grande majorité des Les patients avec des résultats de culture CSF positifs qui ne présentaient pas les caractéristiques cliniques de la neuroborréliose de Lyme européenne étaient dans le groupe B afzelii, alors que les cas typiques étaient presque exclusivement limités au groupe B garinii. pléocyte lymphocytaire os et pléocytose lymphocytaire associée à la radiculonévrite et / ou à la paralysie faciale périphérique, ils sont donc conformes au diagnostic clinique provisoire de la neuroborréliose de Lyme évidente ou très probable, telle que définie dans la présente étude. , les proportions de patients avec une douleur radiculaire sévère, une paralysie faciale périphérique et des signes méningés exprimés étaient en accord avec les résultats européens rapportés pour les patients adultes atteints de neuroborréliose de Lyme [,,], comme presque tous les autres résultats cliniques et du CSF présentés dans les tableaux et Au contraire, les résultats pour le groupe B afzelii étaient assez différents: seuls les patients remplissaient les critères cliniques simples précités pour la neuroborréliose de Lyme, aucun rapportait de douleurs radiculaires, et seulement% présentaient une paralysie faciale périphérique. Certaines différences entre les groupes pouvaient être expliquées, dans une certaine mesure, à la suite de plus longues durées de maladie chez les patients le groupe B afzelii; Cependant, pour plusieurs patients, une telle explication n’est probablement pas applicable. Par exemple, il est hautement improbable qu’un patient souffrant de douleurs radiculaires graves n’essaie pas de trouver de l’aide médicale et reçoive éventuellement un diagnostic de neuroborréliose de Lyme ou qu’un tel patient oublie Par conséquent, les résultats de la présente étude indiquent des différences prononcées entre le groupe B garinii et le groupe B afzelii. Contrairement au groupe B garinii, la grande majorité des Le groupe afzelii ne répondait pas aux critères européens pour la neuroborréliose de Lyme Les résultats de cette étude pourraient indiquer que, bien que B afzelii puisse traverser la barrière hémato-encéphalique, sa capacité à initier une inflammation substantielle du SNC est limitée. La signification de cette génospécie dans la neuroborréliose de Lyme reste à élucider. Les patients avec B garinii isolés à partir d’échantillons de LCR ont Comparativement à celui des patients atteints d’une infection à B afzelii, B garinii provoque ce qui, en Europe, est diagnostiqué comme une neuroborréliose de Lyme précoce typique, soit une méningoradiculonévrite douloureuse ou un syndrome de Bannwarth, alors que les caractéristiques cliniques de l’implication du SNC sont beaucoup moins spécifique et plus difficile à diagnostiquer

Remerciements

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